青海發光桿菌制備工藝的特點
青海發光桿菌細菌、酵母菌的種子制備就是一個細胞數量增加的過程。細菌的斜面培養基多采用碳源*而氮源豐富的配方,牛肉膏、蛋白胨常用作有機氮源。細菌培養溫度大多數為37 ℃,少數為28 ℃,細菌菌體培養時間一般1~2天,產芽孢的細菌則需培養5~10天。
霉菌、放線菌的種子制備一般包括兩個過程,即在固體培養基上大量青海發光桿菌制備和在液體培養基中大量菌絲的種子制備過程。
青海發光桿菌制備是種子制備的開始,是發酵的一個重要環節。孢子的質量、數量對以后菌絲的生長、繁殖和發酵產量都有明顯的影響。不同菌種的孢子制備工藝有其不同的特點。
(1)放線菌孢子的制備 放線菌的孢子培養一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
采用哪一代的斜面孢子接入液體培養,視菌種特性而定。采用母斜面孢子接入液體培養基有利于防止菌種變異,采用子斜面孢子接入液體培養基可節約菌種用量。菌種進入種子罐有兩種方法。一種為孢子進罐法,即將斜面孢子制成孢子懸浮液直接接入種子罐。此方法可減少批與批之間的差異,具有操作方便、工藝過程簡單、便于控制孢子質量等優點,孢子進罐法已成為發酵的一個方向。另一種方法為搖瓶菌絲進罐法,青海發光桿菌適用于某些生長發育緩慢的放線菌,此方法的優點是可以縮短種子在種子罐內的培養時間。
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