青海發光桿菌微生物在一個較寬的溫度范圍內生長。但是，要獲得高質量的孢子，其zui適溫度區間很狹窄。一般來說，提高培養溫度，可使菌體代謝活動加快，縮短培養時間，但是，菌體的糖代謝和氮代謝的各種酶類，對溫度的敏感性是不同的。因此，培養溫度不同，菌的生理狀態也不同，如果不是用zui適溫度培養的孢子，其能力就會下降。不同的菌株要求的zui適溫度不同，需經實踐考察確定。例如，龜裂鏈霉菌斜面zui適溫度為36.5～37 ℃，如果高于37 ℃，則孢子成熟早，易老化，接入發酵罐后，就會出現菌絲對糖、氮利用緩慢，氨基氮回升提前，發酵產量降低等現象。培養溫度控制低一些，則有利于孢子的形成。龜裂鏈霉菌斜面先放在36.5 ℃培養3天，再放在28.5 ℃培養1天，所得的孢子數量比在36.5 ℃培養4天所得的孢子數量增加3～7倍。 
青海發光桿菌斜面孢子培養時，培養室的相對濕度對孢子形成的速度、數量和質量有很大影響。空氣中相對濕度高時，培養基內的水分蒸發少；相對濕度低時，培養基內的水分蒸發多。例如，在我國北方干燥地區，冬季由于氣候干燥，空氣相對濕度偏低，斜面培養基內的水分蒸發的快，致使斜面下部含有一定水分，而上部易干癟，這時孢子長得快，且從斜面下部向上長。夏季時空氣相對濕度高，斜面內水分蒸發得慢，這時斜面孢子從上部往下長，下部常因積存冷凝水，致使孢子生長得慢或孢子不能生長。試驗表明，在一定條件下培養斜面孢子時，在北方相對濕度控制在40％～45％，而在南方相對濕度控制在35％～42％，所得孢子質量較好。一般來說，真菌對濕度要求偏高，而放線菌對濕度要求偏低。 
在培養箱培養時，如果相對濕度偏低，可放入盛水的平皿，提高培養箱內的相對濕度，為了保證新鮮空氣的交換，培養箱每天宜開啟幾次，以利于孢子生長。現代化的培養箱是恒溫、恒濕，并可換氣，不用人工控制。 
青海發光桿菌zui適培養溫度和濕度是相對的，例如相對濕度、培養基組分不同，對微生物的zui適溫度會有影響。培養溫度、培養基組分不同也會影響到微生物培養的zui適相對濕度。