人蛋白elisa檢測(cè)試劑盒采取直接競(jìng)爭(zhēng)法:酶標(biāo)板上包被的抗原與加入的校準(zhǔn)品(或樣本)中的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合加入的酶標(biāo)抗體;洗去多余酶標(biāo)抗體,用TMB底物顯色;樣本吸光值與其殘留物喹諾酮類呈負(fù)相關(guān),與校準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中喹諾酮類的含量。可定性定量檢測(cè)動(dòng)物組織、蜂蜜等樣本中喹諾酮類的殘留量。
試驗(yàn)原理
本試劑盒采取直接競(jìng)爭(zhēng)法:酶標(biāo)板上包被的抗原與加入的校準(zhǔn)品(或樣本)中的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合加入的酶標(biāo)抗體;洗去多余酶標(biāo)抗體,用TMB底物顯色;樣本吸光值與其殘留物喹諾酮類呈負(fù)相關(guān),與校準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中喹諾酮類的含量。
人蛋白elisa檢測(cè)試劑盒的操作步驟:
1、取預(yù)包被的檢測(cè)板(根據(jù)樣品多少,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測(cè)板孔中。陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照各設(shè)2孔,每孔100μl。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),置37℃溫育30分鐘。
2、甩掉板孔中的溶液,用洗滌液洗板5次,200μl/孔,每次靜置3分鐘倒掉,再在干凈吸水紙上拍干。
3、每孔加羊抗豬酶標(biāo)二抗100μl,置37℃溫育30分鐘。
4、洗滌5次, 方法同2。切記每次在干凈吸水紙上拍干。
5、每孔先加底物液A一滴、再加底物液B一滴,混勻,室溫(18℃-25℃)避光顯色10分鐘。
6、每孔加終止液1滴(50μl),10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果(測(cè)定前在震蕩器上輕輕震動(dòng)一下)。