測定法的靈敏度來自作為報告的酶。酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
中分子量單一蛋白Marker(66 kD)
中分子量單一蛋白Marker(45 kD)
中分子量單一蛋白Marker(35 kD)
中分子量單一蛋白Marker(27 kD)
植物蛋白提取試劑(帶酶抑制劑)
真核細胞膜蛋白抽提試劑(帶酶抑制劑)
一步法Western專用封閉液
羊IgG
小鼠漢坦病毒抗體(HV-Ab)ELISA 試劑盒
顯影粉
微量BCA蛋白定量試劑盒
兔IgG-兔IgG
鼠IgG-鼠IgG
藍色預染中分子量蛋白Marker
藍色預染高分子量蛋白Marker
可視型中分子量蛋白Marker
可視型藍色預染中分子量蛋白Marker
考馬斯亮藍R-250
考馬斯亮藍G-250
廣譜彩虹預染蛋白Marker
甘氨酸
定影粉
蛋白銀染試劑盒
蛋白標準溶液-BSA
彩虹預染中分子量蛋白Marker
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