維生素CELISA試劑盒在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。
加標本一般用微量加樣器,按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴,以免發生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。
維生素CELISA試劑盒的工作原理:
本試劑盒采用的是競爭法酶聯免疫吸附檢測技術(ELISA)。測定樣品中維生素D水平。向預先包被了維生素D抗原的酶標孔中,加入標準品和樣本,溫育后,加入生物素標記的抗維生素D抗體。再與HRP標記的鏈霉親和素結合,形成免疫復合物,再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶,然后加入顯色底物TMB,產生藍色,并在酸的作用下轉化成黃色。最后,在450nm處測定反應孔樣品吸光度(OD)值,樣本中的維生素D濃度與OD值成反比,通過繪制標準曲線計算出樣本中維生素D的濃度。
維生素CELISA試劑盒的質量操控方法:
1、規則操控目標的標準預期值)。
2、確定操控的目標。
3、丈量實數據。
4、對比或較對實數據與預期值之間的區別,并說明發生這一區別的因素,超出預訂差錯規模,報警系宣布信號,反響通道中止。
5、制定或挑選操控辦法和手法。
6、采納舉動,處理區別,恢復原狀(原標準狀態)的手法發揮作用。