激光掃描共聚焦顯微鏡(laser scanning confocal microscope,LSCM)是80年代發展起來的一項具有劃時代意義的新產品。
實現了對細胞內部非侵入式光學斷層掃描成像,從而對被檢物體樣品從停留到表面單層,靜態平面的觀察進行到立體,斷層掃描、動態全面的觀察,在生命科學研究中得到迅速應用。
儀器構成
(1)計算機系統:控制著機械,光學、聲學系統及各種外圍設備。
(2)激光照射系統:氬離子激光器和聲光調節器。
光信號接收和成像方式
(1)光信號接收 生物樣品發出的熒光通常有二種接收方式:
①由光電倍增管(PMT)把光信號轉變成電信號;細胞
②利用電荷耦合器(CCD)把光信號轉變成電信號。
(2)成像方式
①載物臺運動成像:以直徑很小的激光束照射樣品,照射點發出的熒光信號經PMT變成電信號,然后載物臺移動到下一點,記錄該點的熒光強度。該方法無軸向像差,成像時間長;
②反射掃描成像方式,細胞通過轉動反射鏡使激光連續照射樣品,由CCD攝像機記錄下照射點所發射的熒光,成像速度快。
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