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    亮發光桿菌之孢子分離法

    點擊次數:714次  更新時間:2018-01-15

    亮發光桿菌孢子分離法,是用食用菌的有性孢子或無性孢子萌發成菌絲,培養成菌種的方法。這種菌種生活力較強,但孢子個體之間有差異,且自然分化現象較嚴重,變異大,需經出菇試驗才能在上應用。  

    (l)單孢分離法:是每次或每支試管只取一個擔孢子, 讓它萌發成菌絲體來獲得純菌種的方法。蘑菇和草菇用單孢分離得到的菌絲,有結實能力,可采用此法分離純菌種。單孢分離上較少采用,而且技術復雜,一般采用多孢分離法。   

    (2)多孢分離法:就是把許多孢子接種在同一培養基上,讓它們萌發、自由交配來獲得食用菌純菌種的一種方法。具體操作方法,有以下幾種: 

    ①種菇孢子彈射法:選擇個體健壯、朵形圓正,無病蟲害、出菇均勻、高產穩產,適應性強的八九分成熟的種菇,切去大部分,菌柄用無菌水沖洗數遍后再用已滅菌的紗布或脫脂棉、濾紙吸干表面水分。在接種箱或無菌室內,把種菇的菌褶朝下用鐵絲倒掛在玻璃漏斗下面,漏斗倒蓋在培養皿上面;上端小孔用棉花塞住。培養皿放在一個鋪有紗布的搪瓷盤上,靜置12~20小時,菌褶上的孢子就會散落在培養皿內。形成一層粉末狀孢子印(平菇極淡紫色,蘑菇、草菇 為褐色,香菇、金針菇孢子印白色)。用接種針沾取少量孢子在試管中的瓊脂外面或培養皿上劃線接種。待孢子萌發,生成菌落時,選孢子萌發早、長勢好的菌落進行試管培養。   

    還可用孢子采集器收集孢子。方法是選好種菇后,按上述程序,輕輕掀開玻璃鐘罩,將種菇柄朝下插在孢子采收器的鋼絲架上,放在培養皿正中央。隨即蓋好玻璃罩,用紗布將鐘掌周圍塞好。并在紗布上倒少許汞或無菌水。移入 20℃左右恒溫箱培養。   

    ②褶上涂抹法:按無菌操作分離時;應選擇成熟的種菇,用接種針直接插入褶片之間,輕輕抹取褶片表面子實體尚未彈射的孢子,再在培養基上劃線接種。   

    ③鉤懸法:取成熟菌蓋的幾片菌褶或一小塊耳片(黑木耳、毛木耳、白木耳〕,用無菌不銹鋼絲(或鐵絲、棉線等其他懸掛材料)懸掛于三角瓶內的培養基的上方,勿使接觸到培養基或四周瓶壁。置適宜溫度下培養、轉接即可。   

    亮發光桿菌貼附法:按無菌操作將成熟的菌褶或耳片取一小塊, 用溶化的瓊脂培養基或阿拉伯膠、漿糊等貼附在配管斜面培養基正上方的試管壁上。經6~12小時的培養,待孢子落在斜面上,立即把孢子連同部分瓊脂培養基移植到新的試管中培養即可。
    20mg/支    Curcurbitacin IIa    雪膽素甲    HPLC≥98%
    20mg/支    Curcurbitacin Iib    雪膽素乙    HPLC≥98%
    20mg/支    vitexicarpin    蔓荊子黃素    HPLC≥98%
    20mg/支    LOUREIRIN B    龍血素B    HPLC≥98%
    20mg/支    Cochinchinenin C    劍葉龍血素C    HPLC≥98%
    20mg/支    demethoxyaschantin    辛夷脂素    HPLC≥98%
    20mg/支    Linderane    烏藥醚內脂    HPLC≥98%
    20mg/支    Fisetin    漆黃素(非瑟酮/紫鉚素)    HPLC≥98%
    20mg/支    Piefeltarraenin ⅠA    苦玄參苷ⅠA    HPLC≥98%
    20mg/支    Piefeltarraenin ⅠB    苦玄參苷ⅠB    HPLC≥98%

     亮發光桿菌 
     

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