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    青海發光桿菌組織培養再生

    點擊次數:684次  更新時間:2017-11-03

    步驟一:青海發光桿菌接種
    組織培養的接種是指將滅過菌的材料,在無菌的情況下,切成小塊,放入培養基的過程。科研、部門的接種工作,多在無菌室或超凈工作臺上進行,中學可制作接種箱,在箱內進行接種。接種的方法步驟如下:
    ①在無菌室或接種箱中放好接種時所需要的酒精燈、貯存70%酒精和棉球的廣口瓶、各種鑷子、接種針、解剖刀、手術剪、火柴、培養基等。
    ②在無菌室或接種箱內用紫外燈滅菌(無菌室照射20~50分鐘,接種箱照射15分鐘)。
    ③放入已滅菌的接種材料(用培養皿盛取)。同時,操作人員用酒精棉球擦手,并對接種工具用酒精燈火焰燒灼。
    ④用手術刀片將材料切割成若干片段,并迅速接種入培養基中。接種時,錐形瓶(或試管)應斜向火焰,在酒精燈火焰附近操作。
    ⑤材料接種好后,將錐形瓶瓶口在酒精燈火焰上轉動燒一遍,蓋好瓶蓋,注明材料名稱及接種日期。
    材料接種后,應置于26~28℃的培養室中進行培養。
    步驟二:青海發光桿菌植株誘導
    本階段是組織培養中zui重要的一環。在培養基中植物激素的作用下,外植體通過三條途徑迅速增殖,這就是側芽增殖、誘導不定芽的形成和誘導胚狀體的形成。
    *    RT    5克    乙酸鈰
    *    RT,避光    1克    2-氨基聯苯
    *        5克    硼氫化鈉
    *    RT    5克    異丙胺
    *    RT    1克    脫脂奶粉
    *    2~8℃,避光    1克    肝浸粉(牛)
    *    RT,避光    25克    瓊脂粉
    *    RT,避光    100克    小牛浸膏粉
    *    RT,避光    5克    三號膽鹽
    *    RT    100克    豬膽鹽
    *    RT,避光    100克    酶水解干酪素
    *        100克    小牛血清
    青海發光桿菌

     

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