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酸性半纖維素酶生化檢測試劑盒

型 號

產品時間2023-11-05

所屬分類糖代謝系列

報價300

產品描述:酸性木聚糖酶生化檢測試劑盒/酸性半纖維素酶生化檢測試劑盒木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業中的原料細胞壁以及β-葡聚糖,降低釀造中物料的度,促進有效物質的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進營養物質的吸收利用,因而廣泛的應用于釀造和飼料工業中,ACX一般分離自耐酸的真菌,細菌及部分霉菌。

產品概述

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產品名稱

規格

貨號

酸性木聚糖酶生化檢測試劑盒/酸性半纖維素酶生化檢測試劑盒

100/48 50/24   

EY-01S1248

 

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測定意義:

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業中的原料細胞壁以及β-葡聚糖,降低釀造中物料的度,促進有效物質的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進營養物質的吸收利用,因而廣泛的應用于釀造和飼料工業中,ACX一般分離自耐酸的真菌,細菌及部分霉菌。

測定原理:

ACX在酸性環境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,進一步在沸水浴條件下與3,5-二水楊酸發生顯色反應,在540nm處有特征吸收峰,反應液顏色的深淺與酶解產生的還原糖量成正比,通過測定反應液在540nm吸光值增加速率,可計算ACX活力。

自備實驗用品及儀器:

天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋,可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

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試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。

試劑四:液體×1支,4℃保存。

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1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

3、血清等液體:直接測定。

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(1)按照蛋白濃度計算

活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照樣本質量計算

活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A÷W

(3)按細胞數量計算

活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細胞數量13.png

(4)按液體體積計算

活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

=1608×△A

ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應時間,1min。

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