參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:嬰兒利什曼蟲PCR檢測試劑盒多少錢
英文名稱:Leishmania infantumPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?嬰兒利什曼蟲PCR檢測試劑盒多少錢原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
L-2-氨基丁酸/L(+)-2-氨基丁酸/S-2-氨基丁酸/L(-)2-氨基丁酸/L-α-氨基正丁酸/L-α-氨基丁酸/L-2-Aminobutyric acidBR,98.5%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1492-24-6RT
D-2-氨基丁酸/D(-)-2-氨基丁酸/D-a-氨基酪酸/D-a-氨基正丁酸/(R)-2-氨基丁酸/2-氨基丁酸/D-2-Aminobutyric acidBR,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2623-91-8RT
DL-2-氨基丁酸/DL-α-氨基丁酸/2-氨基丁酸/α-氨基丁酸/DL-α-氨基酪酸/DL-2-Aminobutyric acidBR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2835-81-6RT
L-高苯丙氨酸/S-苯基丁氨酸/L-2-氨基-4-苯基丁酸/(S)-2-氨基-4-苯基丁酸/L-4-苯基-2-氨基丁酸/(+)-2-氨基-4-苯基丁酸/L-同苯基丙氨酸/L-HomophenylalanineBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,943-73-7RT
D-高苯丙氨酸/D-苯基丁氨酸/R-苯基丁氨酸/D-HomophenylalanineBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,82795-51-5RT
DL-高苯丙氨酸/2-氨基-4-苯基丁酸/DL-HomophenylalanineBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1012-05-1RT
L-高苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽/(S)-(+)-2-氨基-4-苯基丁酸乙酯鹽酸鹽/L-Homophenylalanine ethyl ester hydrochlorideBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,90891-21-7RT
BOC-L-高苯丙氨酸/(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-苯基丁酸/BOC-L-HomophenylalanineBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,100564-78-1RT
BOC-D-高苯丙氨酸/(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-苯基丁酸/BOC-D-HomophenylalanineBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,82732-07-8RT
甘氨酸鈉/甘氨酸單鈉鹽/氨基乙酸鈉/Sodium GlycinateBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6000-44-8RT
L-脯氨醇/L-(+)-羥甲基吡咯烷/(S)-L-脯氨醇/(S)-(+)-脯氨醇/L-ProlinolBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,23356-96-9RT
無水肌酸/N-(氨基亞氨基甲基)-N-甲基甘氨酸/N-胺肉胺酸/α-甲胍乙酸/N-甲基胍基乙酸/CreatineBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,57-00-1RT
N-乙酰-L-纈氨酸/L-2-乙酰氨基-3-甲基丁酸/N-乙酰基-L-穿心排草氨基酸/N-乙酰基-L-纈氨酸/N-Acetyl-L-ValineBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,96-81-1RT
N-乙酰-DL-蛋氨酸/N-乙酰-DL-甲硫氨酸/N-乙酰基-DL-甲硫氨酸/N-乙酰蛋氨酸/N-乙酰-DL-甲硫氨基酸/乙酰-DL-甲硫氨基丁酸/N-Acetyl-DL-MethionineBR,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1115-47-5RT
嬰兒利什曼蟲PCR檢測試劑盒多少錢硫化銨溶液,500mlAluminium-nickel 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
檸檬酸鐵銨,5kgCupric tetrafluoroborate hydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口原裝
檸檬酸鐵銨,500gRetinyl acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%
甲酸銨,500gAcenaphthene 質(zhì)量規(guī)格:AR,分析純
硫酸鋁,十八合物,500g3-Methylanthranilic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,蛋白激酶抑制劑
硫酸鋁,十八合物,2.5kgDiamminedichloropalladium 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
茜素紅 S,25gN-Hydroxysulfosuccinimide sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥80%,美國進(jìn)口
茜素紅 S,1kgβ-methyl-β-hydroxyas 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥80%,美國進(jìn)口
注意事項:
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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