產品及特點:
1. 產品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據伴放線放線桿菌保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
產品名稱 | 巨球菌PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Macrococcus spp.PCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
運輸及保存:
巨球菌PCR檢測試劑盒價格低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,產品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
小分子量蛋白質標準/小分子MARK/SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳小分子量標準蛋白質/Protein little MW marker6200~66200,粉末,6條帶20次/600ug/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
SDS-PAGE蛋白質低分子量標準/低分子MARK/SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳低分子量標準蛋白質/ Mid/SDS-PAGE Molecular low weight markers for proteins14400~97400,粉末,6條帶20次/240ug/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
14.4-116kDa分子量MARK/14.4-116kDa Protein Molecular weight Mark14400~116000,液體,7條帶2×1毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
19-119kDa預先染色分子量MARK/Prestained Protein Molecular weight Mark19000~119000,液體,6條帶2×0.25毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
SDS-PAGE蛋白質次高分子標準/次高分子MARK/SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳次高分子量標準蛋白質/SDS-PAGE Molecular hight weight markers for proteins43000~200000,粉末,5條帶10次/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
SDS-PAGE蛋白質中分子量/中分子量標準蛋白/中分子MARK/Middle range protein MW marker53000~212000,凍干粉175ug/支Pharmacia17-0615-01保存:-20℃
SDS-PAGE蛋白質高分子量/高分子量標準蛋白/高分子MARK/High range protein MW marker67000~669000,凍干粉250ug/支Pharmacia17-0445-01原裝保存:-20℃
低范圍RNA Ladder/RiboRuler Low range RNA Ladder片段:1000,800,600,400,300,200,100100ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
高范圍RNA Ladder/RiboRuler High range RNA Ladder片段:6000,4000,3000,2000,1500,1000,500,200100ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
50bp DNA Ladder/DL50片段:50,100,150,200,250,300,400,500bp50次/300ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
100bp DNA Ladder I/DL100片段:100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1500bp100次/500ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
100bp DNA Ladder Ⅱ/DL3000片段:100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、3000bp50次/300ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
2. 建議凝膠濃度為2-3%瓊脂糖凝膠,電泳電壓4-10v/cm,電泳時間30-40分鐘
植物血球凝集素/植物血凝素/PHABR1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9008-97-32~8℃,避光
巨球菌PCR檢測試劑盒價格Monensin decyl ester 質量規格:>98%,BR
2-Indanone 質量規格:>98%,BR
BOC-D-GLU(OTBU)-OH 質量規格:>98%,BR
(S)-(+)-Methyl mandelate 質量規格:>98%,BR
Epichlorohydrin 質量規格:>99%,BR
tert-Butylhydrazine hydrochloride 質量規格:>98%,BR
Vindoline 質量規格:>98%,BR
7-Benzylamino-4-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazole 質量規格:>98%,BR
技術特點:
1產品僅用于科研準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結果與金標準測序法比對,結果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對,在延伸中產生熒光。
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