參數規格:
產品名稱:人支原體PCR檢測試劑盒價格
英文名稱:Mycoplasma hominisPCR
產品規格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
產品僅用于科研本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
?人支原體PCR檢測試劑盒價格原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
產品僅用于科研特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環,通過多次循環反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合,兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
瓊脂糖蛋白A 英文名稱: Protein A-Sepharose 其他名稱: Protein A–Agarose 產品規格: BR 包裝: 250毫克/1克 級別:BRextent of labeling :~2 mg/ml
金屬硫蛋白 中文名稱: 金屬硫蛋白 英文名稱: MT 其他名稱: Metallothionein 產品規格: 混合體,95% 包裝: 10毫克 產品規格: I型,95%
肌紅蛋白 其他名稱: 肌球素;肌血球素;肌球蛋白 英文名稱: Myoglobin from equine skeletal muscle 其他名稱: Myoglobin from horse skeletal muscle 產品規格: BR,95-100% 包裝: 250毫克/1克CAS號:100684-32-0
瓊脂糖凝膠4B蛋白A 其他英文名稱: Protein A–Agarose 產品規格: BR 包裝: 1毫升 級別:BRextent of labeling :~6 mg/mlmatrix:Sepharose 4B Fast Flow
纖粘連蛋白 其他名稱: 纖連蛋白(人血);纖鏈蛋白;粘連蛋白;纖維結合素;血清纖維結合蛋白 英文名稱: Fibronectin from human plasma 其他名稱: CIG;Cold insoluble globulin 產品規格: 細胞培養級,95% 包裝: 1毫克/5毫克 CAS號:86088-83-7
β-乳球蛋白 英文名稱: β-Lactoglobulin from bovine milk 產品規格: BR,90% 包裝: 250毫克/1克CAS號:9045-23-2級別:BR含量 :≥90% (PAGE)
PUC18 產品規格: BR 包裝: 20微克 級別:BR濃度:450ug/ml性狀:液體或粉末。pUC18是適合于雙脫氧法DNA測序的載體,通常運用于重組dna的分子克隆中,首先我們制備大腸桿菌的感受態細胞(能接受外來重組的dna),這種感受態菌株必須不同外來DNA分子發生遺傳重組,通常是rec基因缺陷型的突變體,同時它們必須是限制系統缺陷或限制與修飾系統均缺陷的菌株,即具有具有這三種缺陷(rk mk rec ),同時對氨芐青霉素敏感(ap)。puc18載體自身帶有抗氨芐青霉素基因,而外源片段不具有,這樣只有帶有puc18的轉化子的菌株才能在氨芐青霉素平板上存活,而外源片段自身環化的不能存活,這稱為抗性篩選。pUC18 上帶有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 個氨基的編碼序列,在這個編碼區中插有一個多克隆位點,且不影響正常功能,DH5α感受態菌株帶有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的編碼信息,當puc18載體在正常情況下同感受態菌株融合后,互補表達具有酶活性的蛋白質,稱為α-互補現象,當有外源片段插入多克隆位點后,互補現象消失,其形成的菌株顏色具有很大的差異,很容易鑒別,這種篩選方法稱為α-互補現象篩選。由上可見,puc18載體除了能重組導入外源片段外,在篩選表達過程中還具有重要的作用用途:生化研究。克隆外源基因。利用lac promoter進行基因表達。使用M13 primers進行DNA測序。
PUC19 產品規格: BR 包裝: 20微克 濃度:350ug/ml性狀:液體或粉末。是一種常用克隆載體,由pBR322改造而來,含有抗氨芐青霉素基因、Lac Z基因及與M13mp18相同的多克隆位點。PUC19與PUC18這兩個質粒的結構幾乎是*一樣的,只是多克隆位點的排列方向相反。重組pUC18/19的克隆轉化細胞可用藍/白斑法篩選。宿主菌:建議用E.coli DH5α、JM109及XL1-Blue做受體菌用途:生化研究。克隆。插入DNA段的測序。制備DNA分子量標準。
人支原體PCR檢測試劑盒價格2-Bromo-4-iodoaniline 質量規格:含量測定
Saikosaponin D 質量規格:>98%,AMPK選擇性抑制劑
Meropenem 質量規格:含量測定
D(-)-Fructose 質量規格:含量測定
2,5-Dibromothiophene 質量規格:含量測定
POLY(N-VINYLCARBAZOLE) 質量規格:HPLC≥98%,標準品
5-Chlorosalicylaldehyde 質量規格:檢查
(S)-(+)-NEOMENTHYLDIPHENYLPHOSPHINE 質量規格:>98%,BR
注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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