產品名稱 | 規格 | 貨號 |
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)生化檢測試劑盒 | 100管/96樣 50管/48樣 | EY-01S1162 |
測定意義:
PEPC(EC 4.1.1.31)廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中,是催化磷酸烯醇式丙酮酸與二氧化碳反應生成草酰乙酸呈不可逆反應的酶,對三羧酸循環的運轉起重要調節作用。
測定原理:
PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和CO2生成草酰乙酸和HPO42-,蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm測定NADH減少速率,計算PEPC活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑一:液體×1瓶,室溫保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。
試劑四:液體×1支,4℃保存。
1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。
2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。
3、血清等液體:直接測定。
(1)按照蛋白濃度計算
活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T
=1608×△÷Cpr
(2)按照樣本質量計算
活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A÷W
(3)按細胞數量計算
活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷細胞數量
(4)按液體體積計算
活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T
=1608×△A
ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應時間,1min。
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定性基因檢測試劑盒 | 含225mlLB1肉湯均質袋 10個/包 用于李斯特氏菌制樣和前增菌培養(GB 標準) | 胰蛋白胨大豆瓊脂培養基 250g 用于普通的或營養要求較高的細菌的培養,還用于醫藥工業潔凈室無菌程度的監測及消毒劑消毒效果的... |
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石蠟切片組織FSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 | YSG培養基基礎(日本標準) 250g 用途:用于清汁、濁汁、水和濃縮果汁中耐酸、耐熱菌的檢測。 | 空腸彎曲菌瓊脂基礎 Skirrow Agar Base Modified 250克 用于空腸彎曲菌的分離培養 |
細胞甘肽合成酶活性比色法定量檢測試劑盒 | 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)生化檢測試劑盒 瓊脂平板(USP)9cm 10個/包 用于金葡菌的分離培養 | 假單胞菌瓊脂基礎培養基/CN瓊脂 250g 用于飲用天然礦泉水檢驗中銅綠假單胞菌的測定。(GB/T 8538-2008) |
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