一抗可用于檢測糖尿病、癌癥、阿爾茨海默病和帕金森病的生物標志物。二抗則主要用于檢測和純化抗原蛋白。
二抗在標記和檢測方面比較靈敏和靈活。所以,它們在流式細胞術、蛋白質印跡和細胞成像等一系列應用中用于一抗的比色、化學發(fā)光和熒光檢測。二抗類型的選擇基于一抗的類別:免疫球蛋白 IgG 或 IgM、標簽類型和來源宿主。
由于大多數一抗是使用少數宿主物種開發(fā)的,并且大多數一抗屬于 IgG 類,因此制造商通常提供可用于許多不同檢測程序和系統(tǒng)的即用型二抗。常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗雞 IgG 或抗山羊 IgG。所選擇的二抗應始終能夠識別產生一抗的宿主物種,例如,為了檢測從小鼠產生的一抗,使用抗小鼠二抗。在 ELISA 和蛋白質印跡中,標記通常是化學發(fā)光、比色或基于熒光的,但在流式細胞術和免疫熒光中,僅使用熒光標記。
產品名稱 | 貨號 | 英文名稱 | 規(guī) 格 | 濃 度 | 抗體來源 |
FITC標記的甲胎蛋白AFP抗體 | EY-0087K | Anti-AFP/FITC | 0.2ml/200μg | 1mg/1ml | Rabbit |
交叉反應 | Human, |
產品類型 | 標記一抗 |
研究領域 | 腫瘤 細胞生物 免疫學 |
理論分子量 | 65kDa |
性 狀 | Lyophilized or Liquid |
免 疫 原 | KLH conjugated synthetic peptide derived from human Alpha Fetoprotein |
亞 型 | IgG |
純化方法 | affinitypurified by Protein A |
儲 存 液 | 0.01M TBSpH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol. |
保存條件 | Store at -20 °C for one year. |
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)elisa檢測試劑盒 | 大腸埃希菌凍干粉 |
微管相關末端結合蛋白2抗體 | 減數分裂缺陷蛋白1抗體 |
電泳級耐熱型 SYBR 染料50μL 人胰島細胞分離液 1.056200mL | 染色液50ml |
大鼠S100B蛋白(S100B)elisa檢測試劑盒 | 鹿氧化酶(XOD)elisa檢測試劑盒 |
細菌總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T | 小鼠白介素27(IL-27)elisa檢測試劑盒 |
小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa檢測試劑盒免費代測 | 小鼠白介素2受體β(IL2Rβ)elisa檢測試劑盒 |
內皮脂肪酶抗體 | DPPH自由基清除能力試劑盒 48樣 比色法 |
整合素αVβ6抗體 | (PRO)含量試劑盒 |
大鼠白介素1β(IL-1B)elisa檢測試劑盒 | 大鼠心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)elisa檢測試劑盒 |
粘蛋白/巖藻糖基轉移酶3抗體 | 大鼠再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)elisa檢測試劑盒 |
大鼠血管動蛋白(AMOT)elisa檢測試劑盒 | Alexa Fluor 488標記的小鼠抗豚鼠IgG |
鹽酸萬液 ,50mg/mL10mL Southern 級細菌 (G-)DNAout10 次 | 大鼠P53(P53)elisa檢測試劑盒 |
DTT,蛋白級5g miRNA 熒光定量檢測試劑盒25 次 | FITC標記的甲胎蛋白AFP抗體磷酸化Bcl-xL(Ser62)抗體 |
大鼠抗增殖細胞核抗原(PCNA)elisa檢測試劑盒 | 人Trem樣轉錄因子1(TREML1)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)elisa檢測試劑盒 | 兔血栓素A2(TXA2)elisa檢測試劑盒 |
一、 免疫動物選擇
根據需要產生目標抗原的免疫反應,選擇合適的免疫動物。例如,小鼠是免疫動物之一,因其易于操作且在免疫應答方面較為強大。
二、抗原免疫
將目標抗原注射到免疫動物體內,通常需要多次免疫以激發(fā)免疫反應。可以選擇不同的免疫路線,如皮下、腹腔、靜脈等。
三 、細胞融合
從免疫動物獲得脾細胞或淋巴細胞,與骨髓瘤細胞或其他癌細胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成雜交瘤細胞。融合細胞通常使用(PEG)或電穿孔等方法促進細胞融合。
四、 雜交瘤細胞篩選
對融合細胞進行篩選,一般使用HAT選擇性培養(yǎng)基,通過對非雜交瘤細胞和單克隆雜交瘤細胞的抗代選擇,篩選出產生目標抗體的單克隆雜交瘤細胞。
五、 單克隆抗體生產
從篩選出的單克隆雜交瘤細胞中獲取單一細胞系,并進行大規(guī)模培養(yǎng)和產生抗體。一般可采用體外或體內方式生產單克隆抗體。
六、抗體純化
通過不同的方法對產生的單克隆抗體進行純化,去除雜質,例如使用蛋白A/G層析、蛋白L層析、蛋白G層析等。
七、 鑒定和驗證
對純化后的單克隆抗體進行鑒定和驗證,例如使用酶聯免疫吸附實驗(ELISA)、免疫印跡(Western blotting)等方法,確定其免疫特異性和活性。
八、應用
將制備好的單克隆抗體應用于具體的研究、診斷或治療等領域,例如免疫組化、流式細胞術、免疫疫治療等。
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