GBC-SD人膽囊癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

雪旺氏細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 小鼠2,3-二0酸甘油酸(2,3-BPG)ELISA試劑盒 Goat anti-GIgG whole serum 羊抗豚鼠IgG抗血清 1ml

FBP1： 果糖1，6-二0酸酯酶抗體 細(xì)胞名稱 種屬

HDMEC-c 人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)來自少年者 500,000cells 肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 小鼠1號染色體開放閱讀框85(C1orf85)ELISA試劑盒 Goat anti-human IgG whole serum 羊抗人IgG抗血清 1ml

Fructose 6 Phosphate Kinase： 60酸果糖激酶抗體 CM-M051小鼠子宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SP2/0(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 Goat anti-human IgM whole serum 羊抗人IgM抗血清 1ml

大鼠軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA 試劑盒 OPG (Rabbit Osteoprotegerin)  兔骨保護(hù)素 96T

METRN： Meteorin神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分化調(diào)節(jié)蛋白抗體 Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系 骨髓瘤,45.6.TG1.7細(xì)胞 Hs888Lu(人肺成纖維細(xì)胞)

ADM Others Human 人 ADM / Adrenomedullin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠酸酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NAADP)ELISA試劑盒 AFP-L3  小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3 96T

MPP5： 棕櫚酰化膜蛋白5抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901

COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞 Renal cell COS-1 in African green monkey SV40 ansformation DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試劑盒 LTB(Human lymphotoxin Beta)  人淋巴毒素β 96T

GBC-SD人膽囊癌細(xì)胞SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人11(KLK 11)ELISA 試劑盒 CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗原 0.5mg

H1FOO： 組蛋白H1FOO抗體 CL-0286M1(小鼠白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

RPMI-8226細(xì)胞，人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌 SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1 人10(KLK 10)ELISA 試劑盒 CCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted) 活化T細(xì)胞表達(dá)和分泌的調(diào)節(jié)因子抗原 0.5mg

HOXB6： 同源盒蛋白B6抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES 人激活素A(Activin A)ELISA試劑盒 CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β抗原 0.5mg

注意事項(xiàng)：

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。