A498人腎透明細(xì)胞癌

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GLUT12： 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12抗體 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24 涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞，Acc-2細(xì)胞 104C1細(xì)胞，轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細(xì)胞

ACVRL1 Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人乳鐵傳遞蛋白/乳抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA 試劑盒 IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 0.1ml

GNLY/NKG5： 顆粒溶素抗體 原代表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml

HL60細(xì)胞，人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 大鼠骨髓瘤細(xì)胞,IR983F細(xì)胞 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基KM 人乳鐵傳遞蛋白/乳(LF/LTF)ELISA 試劑盒 IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 0.1ml

GLI1： 腦膠質(zhì)瘤相關(guān)蛋白抗體 HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

OIF： 骨誘導(dǎo)因子抗體 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2

人小氣管上皮細(xì)胞(HSAEpiC)(5×105 ) MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 Mouse 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA 試劑盒 Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199  人胃腸癌標(biāo)志物CA199 96T

6-Oct： 八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子6抗體 人肝癌細(xì)胞;SMMC-7721

RSPO1 Protein Human 重組人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 大鼠卵白蛋白(OVA)ELISA試劑盒 M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30)  小鼠胚胎干細(xì)胞系MESPU30 96T

OLIG2： 少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子2抗體 VEGFA Others Mouse 小鼠 VEGFA / VEGF164 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

A498人腎透明細(xì)胞癌IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雞低密度脂蛋白(VLDL) ELISA試劑盒 Lipocalin 2 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白 0.5mg

KCC2： 神經(jīng)細(xì)胞氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(拉祜族);KM9406

B95-8細(xì)胞，產(chǎn)EBV的絨猴白細(xì)胞 A549(人肺腺癌細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1 雞肌紅蛋白(MYO/MB) ELISA 試劑盒 Leptin 瘦素 0.5mg

KRAS： 原癌基因K-ras抗體 CD8A Others Mouse 小鼠 CD8a / Lyt2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HBSS 雞環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA 試劑盒 Metronidazole/BSA 偶聯(lián)血清白蛋白 1mg

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。