傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

SRA01/04（HLE） 人晶體上皮細胞永生系

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人羊膜細胞;HA 兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗馬IgM 0.1ml

FEZ1： 腦胚胎鋅指樣蛋白1抗體 小鼠肉瘤瘤株;S180 小鼠表皮角化細胞培養(yǎng)基 100mL

DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照) 兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA 試劑盒 IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗馬IgM 0.1ml

FAM29A： FAM29蛋白抗體 人前列腺上皮細胞RNAHPEpiC miRNA5 μg

SW-13細胞，人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞 豬細胞系(ST),ST細胞 CL-0422RBL-1(大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞)5×106cells/瓶×2 兔抑瘤素M(OSM)ELISA 試劑盒 IgM/PE PE標記的兔抗馬IgM 0.1ml

NCI-H838(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 A9(皮下結(jié)締組織細胞) 大鼠五聚素3(PTX3)ELISA試劑盒 Apo-H(Mouse Apolipoprotein H)  小鼠載脂蛋白H 96T

MIC1： 結(jié)腸癌相關(guān)蛋白MIC1抗體 小鼠前胃癌低轉(zhuǎn)移細胞(綠色熒光蛋白標記);MFC-B5-GFP

IL18 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-18 / IL-1F4 蛋白 (His 標簽) 大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員5A(W5A)ELISA試劑盒 IL1Ra  大鼠白介素1受體拮抗劑 96T

MHC Class II： 組織相容性復(fù)合體β抗體 CCL17 Others Mouse 小鼠 CCL17 / TARC 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠胰島細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員4(W4)ELISA試劑盒 BAFF-R(Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor)  人B細胞活化因子受體 96T

SRA01/04（HLE）人晶體上皮細胞永生系HSH2D： HSH2D抗體 CM-R111大鼠雪旺氏細胞培養(yǎng)基100mL

HEF細胞，人胚纖維細胞系 變形桿菌 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA (LH)ELISA 試劑盒 IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 0.5mg

Hirudin： 水蛭素抗體 EFNB2 Others Mouse 小鼠 EFNB2 / EphrinB2 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5 人促紅細胞生成素抗原(EPO-Ag)ELISA試劑盒 IL-15(Interleukin-15) 白細胞介素-15抗原 0.5mg

HLA Class 1 ABC： 白細胞抗原A抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0927