傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

L wnt3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CLIAKitforLF/LTF(RabbitLactoferrin)ELISAKit兔乳鐵傳遞蛋白/乳規(guī)格：48T/96T

ELISA 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(mouse CF) 48T/96T 進(jìn)口分裝

通用型HRP-DAB底物顯色試劑盒10次

ELISAKitMMP11基質(zhì)金屬11規(guī)格：48T/96T

大鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

新型甲型H1N1流感病毒(IAV-H1N1)檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

HumanPyruvateKinase,M2-PKELISA試劑盒人同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

ELISAKitIGFBP-2小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2規(guī)格：48T/96T

Humanclusterin，CLUELISAKit人凝聚素(CLU)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人去甲(NA) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Duck IgG (aPT1/aPT2) ELISA Kit 鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒

Mousebasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISAKit 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanCollagenaseTypeIIELISAKit人膠原酶II規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞CDK2/CYCLINA激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitU-TSH大鼠高靈敏度促甲狀腺激素規(guī)格：48T/96T

腫瘤壞死因子-α/TNFα抗體

骨骼肌細(xì)胞線粒體膜蛋白PARL抗體

溶質(zhì)載體家族蛋白32成員A1抗體

MOBKL2A蛋白抗體

纖維細(xì)胞生長因子結(jié)合蛋白抗體

白介素4重組兔單克隆抗體

磷酸化HER2受體轉(zhuǎn)換蛋白抗體

CD45RO抗體

L wnt3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞血清反應(yīng)因子輔助蛋白1抗體