收貨處理取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養
傳代代數可傳5代左右;3代以內狀態最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4.待細胞貼壁后,培養觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。
產品名稱 | 大鼠海綿體平滑肌細胞 | 貨號 | EY-XY3459 |
英文名稱 | Rat Sponge Smooth Muscle Cells | 規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產品規格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養基:大鼠海綿體平滑肌細胞培養基
培養條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產品貨期現貨,1周左右
運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
大鼠海綿體平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,大鼠海綿體平滑肌細胞分離自海綿體組織;海綿體,又稱海綿體肌,是最硬的平滑肌和結締組織。海綿體是一種勃起組織,外面包有堅厚的白膜,內部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架,其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質的膠原中,在消化海綿體組織時,膠原酶的作用主要是松解海綿體內皮細胞與基膜的聯系,破壞海綿體內皮細胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細胞。 |
1.準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養液。
7.計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養液調整后,分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8.培養:置于36.5℃溫箱培養,如用CO2溫箱培養,瓶蓋需擰松半圈。
血管內皮鈣粘蛋白抗體
細胞組織E(CATHEPSIN E)活性熒光定量檢測試劑盒
冰凍切片組織組蛋白熒光顯微鏡檢測試劑盒
pPICZ+目的基因
細胞CYTOCHROME C蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
血液O鏈接硫酸酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量阿爾新藍(alcian blue)比色法定量檢測試劑盒
線粒體超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分離試劑盒
組織短鏈脂酰合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)
ACTIVATED PC
組織甘肽合成酶活性比色法定量檢測試劑盒
細胞EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒
載玻片細胞CASPASE-2蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
肉類尿素比色法定量檢測試劑盒
細胞免疫熒光顯微鏡間接檢測試劑盒(含一抗和熒光二抗)
細胞ROCK-I激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
BrdU標記法組織石蠟切片細胞繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒
中心體蛋白70/p10結合蛋白抗體
轉胺酶1抗體
溶質載體家族22成員14抗體
MCF2變換序列樣蛋白2抗體
細胞周期后期促進蛋白亞基11抗體
白蛋白(內參)抗體
磷酸化CD19抗體
大鼠海綿體平滑肌細胞CD23/FcεRII重組兔單克隆抗體
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