收貨處理取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養
傳代代數可傳5代左右;3代以內狀態最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4.待細胞貼壁后,培養觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。
產品名稱 | 小鼠食管成纖維細胞 | 貨號 | EY-XY3629 |
英文名稱 | Esophageal Fibroblasts Cells | 規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產品規格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養基:小鼠食管成纖維細胞培養基
培養條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產品貨期現貨,1周左右
運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內,胸段通過膈孔與腹腔內腹相連,腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,粘膜層與黏膜下層中的結締組織是由成纖維細胞構成。 |
1.準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養液。
7.計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養液調整后,分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8.培養:置于36.5℃溫箱培養,如用CO2溫箱培養,瓶蓋需擰松半圈。
信號轉導相關蛋白3抗體
細胞環氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量檢測試劑盒
酶解法PCR清潔試劑盒
酵母菌SD-TRP/HIS/ADE培養基
石蠟切片組織INSULIN 蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
通用型雞滑液支原體(MS)基因檢測試劑盒
糖一6一磷酸脫氫酶(G6PD)定量檢測試劑盒
通用性甲羥戊酸(mevalonate)含量高效液相層析-質譜法定量檢測試劑盒
體內(in vivo)超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒
髓性過氧化酶活性染色試劑盒
動物細胞醛酮還原酶1E(aldo-keto reductase 1E)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞P35蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
植物果聚糖化學比色法定量檢測試劑盒
溴酚藍(BROMPHENOL BLUE)溶液(100毫克/毫升)
細胞Akt/PKB激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
純化線粒體腫脹比色法測定試劑盒
整合素αVβ3抗體
干擾素相關發育調節蛋白1/神經生長因子誘導蛋白PC4抗體
熱休克蛋白90單克隆抗體
KREMEN1蛋白抗體
細胞色素P450 17抗體
β內酰胺酶樣蛋白抗體
類固醇5α還原酶1抗體
小鼠食管成纖維細胞BCL2相關蛋白A1抗體
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