收貨處理取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養
傳代代數可傳5代左右;3代以內狀態最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4.待細胞貼壁后,培養觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。
產品名稱 | 小鼠滑膜成纖維細胞 | 貨號 | EY-XY3687 |
英文名稱 | Synovial Fibroblasts Cells | 規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測:波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產品規格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養基:小鼠滑膜成纖維細胞培養基
培養條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產品貨期現貨,1周左右
運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
滑膜是關節囊的內層,淡紅色,平滑閃光,薄而柔潤,由疏松結締組織組成。關節腔內的所有結構,除關節軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關節腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。滑膜分泌滑液,在關節活動中起重要作用。正常滑膜分為兩層,即薄的細胞層(內腔層)和血管層(內膜下層),是血管豐富的關節囊內膜,貼附于非關節面部分,覆蓋于關節囊內的骨面上,不在軟骨面上,此部分稱為邊緣區或“裸區"。滑膜呈粉紅色,光滑發亮、濕而潤滑,有時可見絨毛,內含膠原性纖維。滑膜細胞有A、B兩型。巨噬細胞樣A型細胞,表面有絲狀偽足、漿膜內陷 |
1.準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養液。
7.計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養液調整后,分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8.培養:置于36.5℃溫箱培養,如用CO2溫箱培養,瓶蓋需擰松半圈。
新型血小板相關血管內皮分泌蛋白SCUBE1抗體
細胞酶(glutaminase)活性比色法(405)定量檢測試劑盒
通用型DAB顯色溶液
JM109電轉感受態細菌
冰凍切片組織TRAIL 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
通用型嗜肺軍團菌(Legionella pneumophilia)基因檢測試劑盒
冰凍切片制片預處理脫水液
組織腺苷酸環化酶(Adenylate Cyclase)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒
體液氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(過氧亞硝基陰離子)
石蠟切片中性脂質油紅O間接染色試劑盒
體液羥賴(HYL)含量比色法定量檢測試劑盒
?細胞CDK4蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
果菜L-天酶偶聯反應比色法定量檢測試劑盒
同位素法DNA南方雜交印跡試劑盒
細胞肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒
純化線粒體總RNA萃取試劑盒
著絲粒蛋白Q抗體
肝臟X受體β抗體
染色質解旋酶DNA結合蛋白2抗體
KIAA1522蛋白抗體
細胞遷移誘導蛋白19抗體
β2-微球蛋白單克隆抗體
酪蛋白激酶受體A1抗體
小鼠滑膜成纖維細胞Attractin蛋白抗體
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