細胞培養(yǎng)操作:
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數可傳5代左右;3代以內狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
原代淋巴細胞培養(yǎng)體系是一個為體外生長的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動物的淋巴細胞設計的理想的培養(yǎng)基方案。本體系是一個基于碳酸氫鹽的緩沖體系,可以在孵育的5%的CO2的氣體環(huán)境下維持一個圍繞pH7.2的酸堿緩沖體系。本體系是一個無菌的液體混合系統,其中包含必須和非必須氨基酸、維生素、激素、微量元素、IL-2等生長因子和一些其他的有機和無機化合物以及胎牛血清(10%)。本培養(yǎng)體系是基于固定配方配制的液態(tài)培養(yǎng)體系,可以為體外培養(yǎng)的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動物的淋巴細胞提供一個確定適宜的平衡營養(yǎng)環(huán)境,并且可以維持淋巴細胞的生存。
運輸
放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法
基礎培養(yǎng)基2℃~8℃,培養(yǎng)添加劑 -20℃,避光,保存12個月。配置好的培養(yǎng)基2℃~8℃保存1-2個月。
體系組成
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代淋巴細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代淋巴細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25ml | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
產品使用
1) 本產品僅能用于科研
2) 本產品未通過直接用于活體動物和人的審核
3) 本產品未通過用于活體診斷的審核
注意事項
1、收到產品請先檢查包裝是否完好,如有破損,漏液、渾濁等現象請及時聯系我們,培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響產品正常使用。
2、請仔細閱讀產品說明書,了解產品使用方法、保存方式、有效期等信息,若因操作失誤,保存不當而導致產品出現污染等問題的,責任由客戶自行承擔。
3、本產品僅能用于科研,培養(yǎng)基中的一些組分對人體有較低的危害性,如有接觸立即用大量清水沖洗即可。
細胞培養(yǎng)概念:
細胞培養(yǎng)(cell culture)是指在體外模擬體內環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。
細胞培養(yǎng)可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng);直接從體內獲取的組織細胞進行培養(yǎng)為原代培養(yǎng);當原代培養(yǎng)的細胞增殖達到一定密度后,則需要做再培養(yǎng),即將培養(yǎng)的細胞分散后,從一個容器以1:2或其他比率轉移到另一個或幾個容器(同樣底面積的容器)中擴大培養(yǎng),為傳代培養(yǎng),傳代培養(yǎng)的累積次數就是細胞的代數。
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