MIN6小鼠胰島β細胞
細胞基本屬性:
產品名稱 | MIN6小鼠胰島β細胞 | 組織來源 | 胰島 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
支原體檢測 | 無 | 凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細胞詳細介紹:
細胞別稱 MIN6;小鼠胰島β細胞 細胞規格;1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測;無 培養基;90%DMEM+10% FBS+1%PS 培養條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲 發貨方式復蘇發貨(免運輸費用)/ 凍存發貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 特別說明以下細胞培養凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養操作步驟如下:
一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養液中含有細胞碎片的情況下)。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%(細胞懸液變黃)時,即可進行傳代。
(1)嚴格進行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發生污染。
(2)所用培養液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞,對培養液的要求不一樣,必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養液。
(3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進細胞生長起著關鍵作用。可根據文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應保持用至實驗完成。
(4)消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少,或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離,這時的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數量和實驗進度。
(5)細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠,或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應先彈散細胞沉淀,再加入培養液重懸,這樣比直接吹打對細胞損傷小,可以提高細胞活率。
(6)吹打細胞時應盡量避免細胞的產生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生)。
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傳代培養操作步驟:
一、貼壁培養
細胞傳代培養操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態和生長密度,當細胞生長密度達到80%~90%時,即可進行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養瓶內的培養液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據培養瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的,一般應覆蓋整個培養瓶底。
(4)把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時,再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細胞懸液至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養瓶中,補足培養液,搖勻,放置于37℃ CO2培養箱中進行培養。
(8)根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間,甚至進行細胞凍存。
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